高度近视并发性白内障（HMC）是一种比老年性白内障（ARC）发病早、进展快的复杂白内障。随着青少年HMC发病率的增加，HMC患者群体也越来越年轻，但其发病机制尚不清楚。环状RNA（circRNAs）是一种非编码RNA，具有稳定的封闭环状结构，不含3′-poly(A)和5′-cap结构，越来越多的研究表明它与疾病发生发展有关，但它在HMC发病中的作用机制尚不清楚。

      本研究使用24例HMC和24例ARC患者的晶状体膜样本进行全转录组测序，共检测到9192个circRNA，HMC组和ARC组之间共鉴定出1163个显著差异表达的circRNA（DEcRs）。对DEcRs 的宿主基因进行GO富集分析发现， 其主要富集于染色质和蛋白质修饰相关的生物过程，而差异表达基因（DEGs）主要富集在蛋白质靶向结合和RNA分解代谢过程。通过对DEcRs的宿主基因和DEGs进行KEGG富集分析表明它们主要富集在TGF-β、Wnt和mTOR信号通路，这些通路与白内障的发生和发展密切相关。作者基于差异表达miRNA（DEmRs）、DEcRs和DEGs之间的靶向调控和表达量相关性，构建了一个包含120个circRNA、47个miRNA和102个mRNA的竞争性结合RNA（ceRNA）网络，发现circAFF1、circMSH3、circSAFB2、circREPS2和circBPTF是miR-760的潜在靶基因，而miR-760又靶向调控了编码基因TPM1、GOSR2和C7orf50等的表达。

      为了进一步研究circRNA在HMC发生过程中的功能，研究者挑选了4个circRNA（circAFF1、circSLC15A4、circTRPM7和circDENND5B）进行qPCR的验证，结果与测序结果一致。继而将研究方向聚焦到环状RNA circAFF1上，RNA-Fish结果显示circAFF1主要分布在晶状体上皮细胞系（LECs）的细胞质中。将circAFF1过表达的载体LECs （LEC^cAFF1）和空载体LECs（LEC^vector）进行细胞转染培养，发现circAFF1能促进LECs细胞增殖、迁徙，随后的流式细胞术实验表明circAFF1能抑制LECs细胞凋亡。

      使用circAFF1 + miR-760 模拟物表达载体、circAFF1 + 对照miRNA 模拟物表达载体分别共转染HEK293T细胞，发现miR-760模拟物组与对照miRNA模拟物组和空白对照组相比，荧光素酶活力发生显著降低。而另外一组同样处理，但是将circAFF1与miR-760的潜在结合种子序列突变掉，三个处理的荧光素酶活力却没有明显差异，这就证明circAFF1能够通过特定种子序列吸附结合miR-760。为了验证三者之间的ceRNA关系，作者对不同转染处理LECs细胞中TPM1和miRNA的表达量进行qPCR检测，发现LEC^cAFF1与LEC^vector和LECs空白对照组相比，TPM1上调表达，miR-760下调表达，但在LEC^cAFF1中添加miR-760模拟物会导致TPM1发生显著下调，这就说明circAFF1能够通过竞争性结合miR-760调控TPM1表达。

    综上所述，本研究借助全转录组测序探索了circRNAs参与HMC发病的机制，并鉴定出一个具有生物学功能的circRNA分子circAFF1，这对于解析HMC的发生机制以及开发相关治疗策略具有重要意义。